企业动态   2022年08月08日

Bioeast——助力打开高敏肌钙蛋白检测新篇章

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一、cTn标志物介绍


    ⼼肌肌钙蛋⽩(cardiac troponin,cTn)是⼼肌组织损伤时可在⾎液中检测到的特异性⾼和敏感性好的标志物,是诊断急性⼼肌梗死(acute myocardial infarction,AMI)以及对⼼脏疾病进⾏危险分层的良好标志物。⾼敏感⼼肌肌钙蛋⽩(high-sensitive cardiac troponin,hs-cTn)是指⽤⾼敏感⽅法测定cTn。欧洲⼼脏病学会和美国⼼脏病学会于2000年联合提出重新定义AMI, cTn变化成为诊断AMI的⼀个重要条件,这⼀标准随即得到⼴⼤⼼脏病学学者的认同。全球⼼脏病学专家在2007年第2版和2012年第3版⼼肌梗死通⽤定义中推荐将hs-cTn作为⾸选⼼脏标志物。cTn在诊断⼼肌损伤(包括AMI)中的重要作⽤得到⼴泛认同1


肌钙蛋白是一种参与心肌及骨骼肌纤维收缩和舒张的钙介导过程的调节蛋白复合物。肌钙蛋白复合物由三个亚基组成:肌钙蛋白I、T和C。心肌组织特异的肌钙蛋白I和T亚型被称为cTnI和cTnT。cTnI仅在心脏中表达,而cTnT有时也可在病变的骨骼肌中检测到。而由于在心肌及慢骨骼肌中表达的肌钙蛋白C亚型相同,因而当cTnI和cTnT被广泛作为标志物用于心肌损伤的检测时,TnC不能作为心肌标志物使用2


公众号排版(心肌肌钙蛋白-封面).jpg


高敏肌钙蛋白检测系统检测应符合以下两条标准3

1. 参考值上限第99百分位值对应的分析不精密度(CV%,变异系数) 应≤10%;

2. 在表面健康人群血液中检测到cTn的检出率≥50%

 

二、博岳生物cTnI抗体

 

2.1 配对抗体推荐

目前,针对高敏肌钙蛋白I检测,博岳生物推出6种cTnI单克隆抗体,另外还提供重组cTnI抗原。抗体配对推荐如下:

 

表1  用于cTnI双抗夹心免疫检测系统开发的配对推荐

项目产品货号产品类别推荐用途应用平台建议配对
心肌肌钙蛋白ICTnI 101Antibody包被发光、层析、酶免高敏建议采用“2+3”或者“2+2”组合 配对1: 包被(101+106) 标记(103+104+105) 配对2: 包被(101+102)- 标记(104+105) “1+1”组合: 包被102-标记105/104
CTnI 102Antibody标记发光、层析、酶免
CTnI 103Antibody标记发光、层析、酶免
CTnI 104Antibody标记发光、层析、酶免
CTnI 105Antibody标记发光、层析、酶免
CTnI 106Antibody包被发光、层析、酶免
CTnI 301Antigen校准品发光、层析、酶免


初期原料筛选建议使用“1+1”抗体配对模式进行筛选,后续为了进一步提高灵敏度满足高敏肌钙蛋白检测的要求,建议使用“2+1”、“2+2”和“2+3”等模式。

 

2.2 cTnI抗体性能分析

以化学发光平台为例,使用“2+3”模式进行试剂性能分析,其中捕获抗体选择101+106,标记抗体选择103+104+105。结果显示该模式的低值精密度良好<10%,线性范围10-70000pg/mL,最低检出限LoB为1.1pg/mL。84例的临床样本比对显示与雅培cTnI试剂盒之间存在良好的相关性,同时正常人中cTnI检出率>50%。

 

(3)精密度测试:

取3例小于雅培第99百分位值的低值临床样本测试15次,分析显示低值精密度良好 (CV<10%)。结果见图1。


图1 hs-cTnI精密度测试

图表_画板 1 副本 2.jpg




(4)与雅培试剂相关性:

取84例临床样本平行测试,结果显示两种试剂呈显著相关(R=0.9909)。见图2。


图2  hs-cTnI临床比对结果(N=84)

图表_画板 1 副本 3.jpg


(5)线性范围

取1例高值临床样本,由雅培试剂盒(I 1000)测试确定浓度后,按比例连续稀释成一系列梯度测试,对样本理论浓度和测试浓度做回归分析,分析显示,在10-70000pg/mL范围内,线性相关系数r>0.99。见图3。


图3 hs-cTnI线性范围

图表_画板 1 副本 4.jpg


(6)低值样本与雅培试剂的一致性

取55例低值临床样本(<120pg/ml)平行测试并做线性回归分析,分析显示两者呈显著相关 ( R=0.9827 )表明低值样本与雅培试剂一致性比对良好。见图4。


图4   hs-cTnI低值一致性对比(N=55)

图表_画板 1 副本 5.jpg


(7)cTnI试剂灵敏性

按EP17-A文件测试自研试剂灵敏度LOB=1.1pg/mL,LOD=1.8pg/mL,LOQ=2.8pg/mL。


图5  cTnI试剂灵敏性

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(8)正常人样本检测

50例正常人样本测试,本批样本结果显示检出率80%,符合高敏肌钙蛋白检测系统的标准(>50%)。见图6。


图6  正常人样本检出率


图表_画板 1 副本 7.jpg


参考文献:

1、⾼敏感⽅法检测⼼肌肌钙蛋⽩临床应⽤中国专家共识(2014)

2、Adamcova M, Popelova-Lencova O, Jirkovsky E et al. (2016). Cardiac troponins-Translational biomarkers in cardiology: Theory and practice of cardiac troponin high-sensitivity assays. Biofactors 42:133–148.

3、Prof. Fred S. Apple, personal communication.

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